Kit PRP SIÊU RẺ

Thành phần: ACD-A solution

-Acide Citric

-Tri-Sodium citrate

-Dextrose

-ED vừa đủ: 1.5 ml

Ống nghiệm ACD-A là môi trường dinh dưỡng giúp nuôi dưỡng và bảo quản các tế bào máu đặc biệt là tiểu cầu, tế bào gốc.. vì vậy nguyên tắc vô trùng cần đảm bảo tuyệt đối. Tube ACD-A đã vô trùng bằng phương pháp Autoclave tại 1210C trong 20 phút và khử trùng bằng tia U hoặc tia Gamma. Luôn bảo quản ống nhiệt độ lạnh 2-40C.

Qui trình tách PRP ly tâm hai lần

Bước 1: Để ống nghiệm về nhiệt độ phòng 5-10 phút trước khi lấy máu.

Bước 2: Lấy máu bệnh nhân bằng bơm tiêm 10 ml hút 8,5 ml hoặc bằng kim bướm ống chân không.

Bước 3: Bơm máu theo nhẹ theo thành ống nghiệm đúng 8,5ml. Có dùng lượng máu thể ít hơn nhưng không được quá 8,5ml hoặc dùng hệ thống lấy máu chân không hút cho đến khi máu không hút được nữa nếu lấy thêm máu đưa ống vào holder màu vàng chọc kim vào ống lấy lần 2

Bước 4: Đảo ống nghiệm từ 8-10 lần theo chiều lên xuống và xoay tròn.

Bước 5: Để yên 5-10 phút nhiệt độ phòng

Bước 6: Tiến hành ly tâm lạnh ở tốc độ 2000-2500 vòng/10 phút. Nếu không có máy ly tâm lạnh có thể dùng các tube falcon chứa nước bỏ tủ lạnh để làm giảm nhiệt độ lúc ly tâm. Chú ý cân bằng.

Bước 7: Tách ngay lớp huyết tương PRP và PPP vào tube falcon 15 ml vô trùng bằng dụng cụ vô trùng như pipet 3.0ml vô trùng hoặc đầu cone vô trùng

Bước 8: Ly tâm mạnh lần 2 tốc độ 3200 v/phút trong 10 phút

Bước 9: Hút ngay 1/3 huyết tương thu thập được trên cùng cho vào tube 2.0 ml ( huyết tương nghèo tiểu cầu PPP) Tách huyết tương giàu tiểu cầu PRP ở vị trí 2/3 dưới của huyết tương.

Tuỳ theo mục đích sử dụng có thể kích hoạt tiểu cầu hay không bằng thrombin hay CaCl2 ( nên sử dụng các thành phần không gây hiện tương dị ứng. Tiểu cầu được kích hoạt sẽ phóng thích các yếu tố tăng trưởng tiểu cầu vào huyết tương. Quá trình kích hoạt huyết tương sẽ hình thành sợi fibrin.

Kích hoạt tiểu cầu:

Bước 10: Cho chất hoạt hóa r1 Vào ống trộn đều. sau đó cho R2 lắc đều và để yên 1phut 17s

Bước 11: Ủ nhiệt độ 370C trong 10-15 phút hay nhiệt độ phòng 15-20 phút.

Bước 12: Vortex nhanh bằng máy vortex 30s hoặc trộn nhiều lần huyết thanh bằng pipet

Bước 13: Quay ly tâm 4000v/phút/10 phút

Bước 14: Tách hết huyết thanh (tránh cặn) cho vào tube vô trùng lưu trữ hoặc sử dụng.

Lưu ý: -Bảo quản lạnh tube acd 2-4 độ C

- Tốc độ ly tâm là yếu tố quan trọng trong tách huyết tương